Identificación de biomarcadores de diagnóstico no invasivos para el embarazo ectópico utilizando datos

Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 19992 (2022) Citar este artículo

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En la actualidad, el diagnóstico de embarazo ectópico depende principalmente de la ecografía transvaginal y la β-hCG. Sin embargo, estos métodos pueden retrasar el tiempo de diagnóstico y tratamiento. Por lo tanto, nuestro objetivo fue buscar marcadores moleculares serológicos para el diagnóstico temprano del embarazo ectópico (EP). Usando proteómica de adquisición independiente de datos (DIA), se seleccionaron las proteínas diferenciales en el suero entre los grupos de embarazo intrauterino (IP) y EP. Luego, los niveles de expresión de estas proteínas diferenciales se midieron mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. El valor diagnóstico de los biomarcadores séricos se evaluó mediante el análisis de la curva característica operativa del receptor. GSTO1, ECM-1 y β-hCG mostraron diferencias significativas entre los grupos EP e IP (P < 0,05). La combinación de GSTO1/ECM-1/β-hCG tuvo un área bajo la curva de 0,93 (IC 95 % 0,88–0,99), una sensibilidad de 88,89 % (IC 95 % 73,94–96,89) y una especificidad de 86,11 % (95 % IC 70,50–95,33) con un cociente de probabilidad de 6,40. La combinación de GSTO1/ECM-1/β-hCG puede convertirse en un posible enfoque para el diagnóstico precoz de EP.

El embarazo ectópico (EP) se define como un embarazo que ocurre fuera del útero, más comúnmente en una trompa de Falopio, también puede ocurrir en un ovario, la cavidad abdominal y un cuerno uterino1. La prevalencia del embarazo ectópico se estima en el 2% de todos los embarazos, es una causa importante de mortalidad en mujeres embarazadas2. En la actualidad, todavía representa el 6% de las morbilidades asociadas al embarazo3. Los síntomas típicos del embarazo ectópico son el cese de la menstruación, el dolor abdominal repentino y el sangrado vaginal4. En casos severos, puede ocurrir síncope, shock e incluso la muerte4. Por lo tanto, el diagnóstico y el tratamiento temprano del embarazo ectópico son especialmente importantes. En la actualidad, el diagnóstico de embarazo ectópico depende principalmente de la ecografía transvaginal y de la medición cuantitativa de la subunidad β de la gonadotropina coriónica humana (β-hCG)5. Sin embargo, en la práctica, una paciente solo visita al médico después de dolor abdominal y sangrado vaginal, lo que retrasa fácilmente el diagnóstico y el tiempo de tratamiento. Además, los métodos de diagnóstico actuales deben realizarse en el hospital, queremos desarrollar un método de detección temprana para embarazos ectópicos que se pueda usar en el hogar, a fin de reducir en gran medida el daño del embarazo ectópico. Por lo tanto, alerta temprana y mejor diagnóstico de embarazo ectópico son temas urgentes.

En los últimos 20 años, los investigadores han estado buscando marcadores serológicos de embarazo ectópico, pero hasta ahora se ha avanzado poco debido a diversas dificultades. En la actualidad, la β-hCG sigue siendo el marcador sérico más utilizado en la práctica clínica, pero un solo nivel de β-hCG en suero solo puede reflejar el embarazo, pero no la ubicación del embarazo. Por lo tanto, la β-hCG sérica no es adecuada para el diagnóstico de embarazo ectópico.

Para diagnosticar mejor el embarazo ectópico, se han realizado varios estudios y se han identificado varios indicadores, como progesterona, VEGF, inhibina A, activina A o una combinación de progesterona, β-hCG, CA125 y porcentajes de células T CD3+6 . En 2007, Florio et al. informó por primera vez que la activina A se puede utilizar para predecir el embarazo ectópico7. Cuando el límite de detección se fijó en 0,37 ng/ml, la sensibilidad y la especificidad fueron del 100 % y del 99,6 %, respectivamente. Sin embargo, el resultado no se confirmó en estudios confirmatorios posteriores. Yan et al. reportaron que la sensibilidad y especificidad de la Adrenomedulina (ADM) en la detección de embarazo ectópico fueron solo del 53,50% y 85,00%, respectivamente8. Sin embargo, estos factores tienen una viabilidad limitada debido a resultados contradictorios o baja sensibilidad y especificidad.

La adquisición independiente de datos (DIA) es una técnica proteómica cuantitativa emergente que permite la creación de perfiles de proteínas rápidos y sensibles a partir de mezclas complejas. Esta detección proporciona una identificación y cuantificación inequívocas de todos los lípidos (tanto picos abundantes altos como bajos). Utilizando funciones de escaneo novedosas y flujos de trabajo de procesamiento de datos, DIA representa un cambio de paradigma en las expectativas asociadas con el análisis proteómico cuantitativo9. El objetivo de este estudio fue detectar marcadores moleculares serológicos de embarazo ectópico con la aplicación de proteómica cuantitativa basada en adquisición independiente de datos (DIA).

En este estudio, reclutamos a 36 mujeres con embarazo ectópico y 36 mujeres con embarazo temprano normal como controles después de la evaluación clínica, β-hCG y ecografía vaginal. La información demográfica y las características clínicas se proporcionan en la Tabla 1. Los resultados del embarazo incluyeron 36 (50,0 %) IP viables y 36 (50,0 %) EP. Se colocaron veintisiete PE (75,0%) en trompas de Falopio y nueve (25,0%) en incisiones uterinas. Ambos grupos de mujeres se encontraban en las primeras etapas del embarazo, y no se observó diferencia significativa en cuanto a la edad y la edad gestacional (P > 0,05), que se determinó por el primer día de la última menstruación. Además, los niveles de β-hCG se pudieron medir en todas las muestras y fueron significativamente (P < 0,001) más bajos en el grupo EP que en el grupo IP (Tabla 1).

Los biomarcadores potenciales en las muestras de suero para evaluar la actividad se seleccionaron utilizando proteómica de adquisición independiente de datos (DIA). Como se muestra en la Fig. 1, en las 5 muestras evaluadas, cada muestra tiene múltiples puntos positivos. Las intensidades de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B y ECM-1 en las muestras de suero del grupo EP fueron significativamente diferentes de las del grupo IP. Estos resultados indican que estos marcadores serológicos pueden ser dianas útiles para el diagnóstico de EP.

Gráfico de volcán (A) y mapa de calor de clúster (B) de las proteínas expresadas diferencialmente entre el grupo IP y EP.

La expresión de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B, ECM-1 y β-hCG en suero se midió mediante ELISA (n = 36). Como se muestra en la Fig. 2, los niveles de expresión de GSTO1 fueron significativamente más altos en pacientes con PE que en pacientes con embarazo normal (P = 0,01). Aunque CLEC3B no mostró diferencias entre EP e IP, el nivel de expresión de CLEC3B en TEP disminuyó significativamente (P = 0,04). Curiosamente, las concentraciones de ECM-1 en EP y TEP fueron significativamente más bajas que las de IP (P < 0,001). Los niveles de β-hCG fueron significativamente más bajos en los embarazos EP y TEP que en los embarazos normales (P < 0,001). No hubo diferencia estadísticamente significativa en TSP1, INHBC o CLEC3B entre los tres grupos.

Concentraciones de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B, ECM-1 y β-hCG en suero de mujeres IP y EP. Los datos se presentan como media ± desviación estándar.

El análisis de subgrupos según la edad gestacional (< 50 vs. ≥ 51 días) mostró que los niveles de GSTO1 fueron significativamente más altos en pacientes con EP cuya edad gestacional ≥ 51 días en comparación con pacientes con IP cuya edad gestacional ≥ 51 días (P = 0.01) y pacientes con PE cuya edad gestacional < 50 días (P = 0,02). Las concentraciones de ECM-1 en pacientes EP cuya edad gestacional era < 50 días fueron significativamente más bajas que las de los pacientes IP (P = 0,01). También se observaron los mismos niveles más bajos de ECM-1 en pacientes EP cuya edad gestacional era ≥ 51 días (P < 0,001). Además, las concentraciones de β-hCG de las pacientes EP cuya edad gestacional ≥ 51 días fueron más bajas que las de las pacientes IP cuya edad gestacional ≥ 51 días (P = 0,001) (fig. 3).

Análisis de subgrupos de concentraciones de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B, ECM-1 y β-hCG en suero de mujeres IP y EP según edad gestacional (< 50 vs. 51 días). Los datos se presentan como media ± desviación estándar.

La curva ROC se utilizó para evaluar la sensibilidad/especificidad, valor predictivo positivo/negativo, razón de verosimilitud (LR) y área bajo la curva (AUC) de GSTO1, INHBC, β-hCG y diferentes combinaciones como pruebas diagnósticas. La Tabla 2 y la Fig. 4 demuestran la capacidad discriminatoria significativa del aumento de GSTO1, ECM-1, β-hCG y diferentes niveles de combinación para el diagnóstico de EP.

Curvas características de funcionamiento del receptor de GSTO1, ECM-1 y β-hCG.

En detalle, GSTO1 en el punto de corte de 4343 pg/ml logró una sensibilidad del 63,89 % (intervalo de confianza [IC] del 95 %, 46,22–79,18) y una especificidad del 69,44 % (IC del 95 %, 51,89–83,65) como suero único marcador de predicción de EP (AUC: 0,70 (IC 95 %, 0,58–0,82)), con un LR de 2,09. Cuando se utilizó una concentración de ECM-1 de 4732 pg/ml como punto de corte para el diagnóstico de PE en el grupo de control, la sensibilidad fue del 72,22 % (IC 95 %, 54,81–85,80), la especificidad fue del 75,00 % (IC 95 % , 57,80–87,88) como marcador sérico único para la predicción de EP (AUC: 0,82 (IC 95 %, 0,72–0,91)), y el LR fue 2,89. La β-hCG en el punto de corte de 24 300 mUI/ml logró una sensibilidad de 80,56 % (IC 95 %, 63,98–91,81) y una especificidad de 77,78 % (IC 95 %, 60,85–89,88). El AUC para β-hCG fue de 0,83 (IC 95%: 0,74-0,93), con un LR de 3,63. Al combinar todos los factores, construimos la Fórmula y = (0.0003*GSTO1)-(0.001*ECM1)-(0.00003*hCG) + 3.518. La detección combinada de estos tres marcadores serológicos tuvo un AUC de 0,93 (IC 95 %, 0,88–0,99), una sensibilidad de 88,89 % (IC 95 %, 73,94–96,89) y una especificidad de 86,11 % (IC 95 %, 70,50– 95,33) con una LR de 6,40.

Dado que el diagnóstico de embarazo ectópico es un desafío clínico en la edad gestacional temprana, la forma de explorar un biomarcador para simplificar y mejorar el diagnóstico de embarazo ectópico es un enfoque de investigación. Algunos estudios demostraron que no existe un único biomarcador de diagnóstico para embarazo ectópico tubárico que tenga adecuadamente probado y arroja resultados satisfactorios10. El uso de análisis de marcadores séricos múltiples podría ser una posible solución para el diagnóstico de EP. En este estudio encontramos que GSTO1, ECM-1 y β-hCG pueden ser marcadores serológicos para el diagnóstico precoz de EP, especialmente cuando se combinan los tres factores, con la mejor sensibilidad y especificidad.

Todos los marcadores que elegimos son biológicamente plausibles. La glutatión transferasa (GST) es una gran familia de transferasas que está relacionada con la progresión de los tumores y el metabolismo de objetos extraños (como los contaminantes ambientales)11. Se ha confirmado que Omega-GST 1 existe ampliamente en una variedad de tejidos y tiene la actividad de una variedad de enzimas biológicas, especialmente aquellas involucradas en la biotransformación del arsénico12,13,14. Algunos estudios han encontrado que existe una relación estadística entre el aborto recurrente y la mutación GSTO1 durante el embarazo. Además, especularon que esta relación está relacionada con el cambio en la actividad de la ascorbato reductasa y el metabolismo del arsénico causado por la mutación GSTO115. En un estudio de la relación entre el embarazo y GSTO1, también se encontró que GSTO1 estaba relacionado con la restricción del crecimiento fetal intrauterino16,17. En este estudio, encontramos que durante más de 51 días de embarazo, los niveles de GSTO1 en los grupos IP y EP fueron significativamente diferentes, pero la sensibilidad y la especificidad de la diferencia no fueron altas.

La proteína de matriz extracelular 1 (ECM-1) es una glicoproteína que normalmente actúa como una proteína central de unión funcional e interactúa con una variedad de proteínas para regular la angiogénesis y el crecimiento tumoral18. Por ejemplo, la interacción de ECM-1 con la metaloproteinasa de matriz 9 (MMP9), el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), CX3CL1 y CCL14 está involucrada en la aparición y desarrollo de muchas enfermedades19,20,21. Graubner et al. propusieron que se puede observar una gran cantidad de ECM1 en el epitelio endometrial en la etapa temprana del embarazo, lo que puede estar relacionado con la decidualización y la preparación para la implantación22. A medida que avanza el embarazo, la cantidad de ECM-1 cambia en consecuencia, lo que sugiere que ECM-1 juega un papel importante en el mantenimiento del embarazo y el desarrollo fetal23,24. Hannan et al. encontró que CX3CL1 y CCL14 promueven la migración del trofoblasto en el embarazo temprano al regular ECM-120. Por lo tanto, exploramos la relación entre ECM-1 y EP y encontramos una diferencia significativa entre el grupo IP y el grupo EP, lo que sugiere la posibilidad de ECM-1 en el diagnóstico de EP temprana.

Otros marcadores del desarrollo del embarazo fueron menos significativos. La trombospondina-1 (TSP-1) es un índice sensible para monitorear la activación plaquetaria in vitro25. Los estudios han demostrado que la expresión de TSP-1 tiene cierta relación con el embarazo y el nivel de expresión en diferentes tejidos musculares es diferente en las diferentes etapas del embarazo, lo que asegura la formación normal de vasos sanguíneos durante el embarazo y mantiene la estabilidad de los vasos sanguíneos. cama26,27. La inhibina beta C (INHBC) pertenece a la familia del factor de crecimiento transformante beta (TGF-β), existe ampliamente en la placenta y el endometrio y tiene un efecto antiproliferación celular28,29,30. Abdoli et al. y Fortes et al. señalaron que el gen INHBC está involucrado en la herencia de los rasgos reproductivos de ovejas y vacas31,32, y algunos académicos también señalaron que INHBC está involucrado en el proceso de implantación del blastocisto33. El miembro B de la familia 3 del dominio de lectina de tipo C (CLEC3B) es una proteína de unión que tiene un efecto de unión específico sobre el plasminógeno kringle-434. Rocha et al. propusieron que el feto puede estimular la secreción de CLEC3B durante el embarazo, por lo que CLEC3B tiene un papel en el diagnóstico del embarazo temprano35. Desafortunadamente, en este estudio, no encontramos una diferencia significativa en estos tres marcadores entre el grupo IP y el grupo EP, pero se necesita más estudio.

Como el indicador serológico de EP más utilizado, la β-hCG juega un papel muy importante en el diagnóstico del embarazo ectópico temprano. A menudo, los niveles bajos de β-hCG pueden sospechar la posibilidad de EP, pero la β-hCG por sí sola no confirma ni descarta la EP, lo que concuerda con nuestros resultados experimentales36,37,38. Aunque hubo diferencias significativas entre el grupo IP y el grupo EP, la sensibilidad y especificidad de la β-hCG para el diagnóstico de EP fueron pobres, y GSTO-1 y ECM-1 mostraron los mismos resultados. Sin embargo, cuando se combinaron β-hCG, GSTO-1 y ECM-1, tanto la sensibilidad como la especificidad aumentaron significativamente, lo que sugiere la posibilidad de un diagnóstico temprano de EP.

Debido al éxito limitado de las mediciones de biomarcadores séricos individuales, varios investigadores han comenzado a investigar la posibilidad de utilizar el análisis de varios marcadores para diagnosticar el embarazo ectópico tubárico. O'Leary et al. examinó los niveles de progesterona y β-hCG y descubrió, en estudios preliminares, que una β-hCG plasmática < 3000 UI/l y una progesterona plasmática < 40 nmol/l podían predecir un embarazo ectópico tubárico con una sensibilidad del 88 % y una especificidad del 82 %39. Un estudio retrospectivo analizó a 289 mujeres en el servicio de urgencias que fueron diagnosticadas con EP, aborto espontáneo o embarazo intrauterino viable, y los investigadores recolectaron las concentraciones séricas de progesterona, hCG y activina A de estas pacientes y realizaron análisis estadísticos40. Sus hallazgos sugieren que los puntos de corte de progesterona (< 10 ng/ml), hCG (< 6699 UI/l) y activina A (< 0,26 ng/ml) se optimizaron mediante el análisis ROC, y el panel de marcadores múltiples que utilizó los tres biomarcadores tuvo una sensibilidad del 70% y una especificidad del 69%40. Nuestro estudio también confirma estos hallazgos de que combinar varios marcadores en una sola prueba con mejores diagnósticos que las proteínas individuales. Además, los resultados de nuestro estudio fueron similares a los de los estudios anteriores en términos de sensibilidad y especificidad.

Hay limitaciones en este experimento. En primer lugar, estos hallazgos se consideran preliminares y muchos de los análisis no se utilizan de forma rutinaria en la práctica clínica. La validación externa de los planes futuros se realizará en un conjunto separado de muestras. En segundo lugar, el tamaño de nuestra muestra es relativamente pequeño, lo que puede conducir a una desviación de los resultados. Se sugiere utilizar un tamaño de muestra mayor en futuras investigaciones. Además, los resultados de varias proteínas en el grupo IP y el grupo EP mostraron poca diferencia, lo que puede no aplicarse al índice de examen clínico rápido.

En conclusión, el presente estudio revela que GSTO1/ECM-1/β-hCG en suero pueden ser biomarcadores potencialmente útiles para el diagnóstico temprano de EP, lo que debería confirmarse en estudios con tamaños de muestra más grandes. Esperamos presentar este resultado de investigación a proporcionar inspiración para los investigadores posteriores en el diseño de la investigación y las ideas de investigación.

En el grupo de EP, los criterios de inclusión incluyeron 4 a 12 semanas de embarazo, dolor abdominal, sangrado y otros síntomas clínicos, y diagnóstico de EP confirmado por ultrasonografía transvaginal (que incluye embarazo tubárico, embarazo en la cicatriz de la incisión uterina y embarazo en el cuerno uterino). Se excluyeron mujeres con antecedentes de menopausia y aumento de β-hCG sérica pero sin diagnóstico confirmado por ecografía o mejoría tras tratamiento conservador. En el grupo de embarazo intrauterino (IP), los criterios de inclusión incluyeron 4 a 12 semanas de embarazo, sin dolor abdominal, sangrado u otros síntomas clínicos, y yema fetal uterina confirmada por ecografía. Se registraron los datos clínicos de todas las pacientes, incluida la edad, la edad gestacional, la concentración sérica de β-hCG, la concentración de progesterona y el diagnóstico clínico. todos los pacientes firmaron formularios de consentimiento informado.

Se recogieron de 2 a 3 ml de una muestra de sangre venosa periférica de pacientes EP e IP en hospitales de tercer grado A. Las muestras se centrifugaron a 1000 rpm a 4 °C durante 10 min y el suero se separó, envasó y almacenó a -80 °C hasta su uso. Todas las muestras fueron seleccionadas de individuos Han no relacionados.

Se usaron diez muestras de suero (de 5 pacientes EP y 5 pacientes IP) para realizar el cribado proteómico mediante adquisición independiente de datos (DIA). Todas las muestras seleccionadas se emparejaron por edad y edad gestacional (consulte la Tabla 1 complementaria).

La primera etapa es la extracción de muestras y el control de calidad. En primer lugar, se añadieron 10 μl de suero de cada muestra (que contenía inhibidores de tripsina) a la suspensión de resina en la columna a temperatura ambiente (RT). Después de mezclar, la columna se colocó en el rotador y se hizo girar durante 1 h. En segundo lugar, con el fondo y la tapa retirados, la columna se colocó en un tubo EP de 2 ml y se centrifugó a 1000 g durante 2 min a 4 °C. En tercer lugar, después de la eliminación de las 12 proteínas principales en abundancia del plasma, las muestras eluidas se reservaron mediante liofilización al vacío. La muestra liofilizada se añadió a 100 μl de SDS para la redisolución y posteriormente se centrifugó a 12 000 g durante 10 min a temperatura ambiente. El sobrenadante fue la solución de proteína total, cuya concentración se determinó por el método del ácido bicinconínico (BCA). Finalmente, cada muestra (8 µg) se separó mediante electroforesis en gel de poliacrilamida SDS al 12% (SDS-PAGE). Después de eso, los geles separados se tiñeron con azul brillante de Coomassie y posteriormente se lavaron con agua destilada hasta que el fondo quedó claro. Para el control de calidad, los geles se escanearon usando ImageScanner, que se usó para juzgar si era posible realizar experimentos de seguimiento de acuerdo con las imágenes.

La segunda etapa es el experimento DIA. Primero, después de la cuantificación de proteínas, se colocó una muestra de 30 μg en un tubo de ultrafiltración y se hizo reaccionar con 120 μl de tampón reductor (DTT 10 mM, urea 8 M, TEAB 100 mM; pH 8,0) a 60 °C durante 1 hora. Después de la reacción, se añadió IAA hasta que la concentración final fue de 50 mM y el tiempo de reacción fue de 40 min a TA sin luz. La solución en el fondo del tubo colector se descartó después de centrifugar a 12 000 rpm a 4 °C durante 20 min. Después de eso, se agregaron 100 μl de tampón (TEAB 300 mM) al tubo y se centrifugó dos veces a 12 000 rpm durante 20 min. Después de reemplazar el tubo de recolección, se agregaron 100 μl de tampón (TEAB 300 mM) y 2 μl de solución de tripsina de grado de secuenciación (1 μg/μl) al tubo de ultrafiltración y se hizo reaccionar a 37 °C durante 12 h. Los péptidos después de la enzimólisis se recogieron después de centrifugar a 12.000 rpm durante 20 min. Posteriormente, se añadieron al tubo 50 μl de tampón (TEAB 200 mM) y se centrifugó a 12.000 rpm durante 20 min. La solución del fondo del tubo se recogió y liofilizó. En segundo lugar, después de la enzimólisis y la liofilización, los péptidos se volvieron a disolver con 1 ml de TFA al 0,1 % y se desalinizaron con una columna de extracción en fase sólida (SPE) RP-C18. En tercer lugar, para el análisis LC-MS/MS, la muestra estándar de IRT y la muestra que se analizará se mezclaron de acuerdo con una proporción de volumen de 1:10 y se realizó un análisis de espectrometría de masas.

Después de la separación de fase líquida de pH alto y la espectrometría de masa líquida, los péptidos enzimolizados de cada muestra se recolectaron por separado en la computadora y se estableció una biblioteca espectral utilizando el software Spectreonaut Pulsar X para el análisis de datos. La prueba t se realizó en los valores repetidos de cada grupo para calcular el cambio de veces y el valor de P de cada grupo de comparación, y luego se realizó una selección de dos estándares (cambio de veces = 1,2, valor de P < 0,05). Se consideró que las proteínas (cambio de pliegue > 1,2 o < 5/6, valor de P < 0,05) eran proteínas expresadas de forma significativamente diferencial, que se enumeran y marcan con colores.

La verificación de muestras grandes de las proteínas (cambio de pliegue > 1,2, valor de P < 0,01) se realizó mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) utilizando kits comerciales adquiridos de RayBiotec, Inc. (Norcross, GA), R&D Systems (Minneapolis, MN) y Abbexa, Inc. (Pekín, China). Los experimentos se realizaron siguiendo los procedimientos sugeridos por el fabricante.

Concentraciones de trombospondina-1 (TSP1), glutatión S-transferasa omega-1 (GSTO1), inhibina beta cadena C (INHBC), tetranectina (CLEC3B), proteína de matriz extracelular 1 (ECM-1) y β-hCG en el suero de Las mujeres IP y EP se presentan como la media ± desviación estándar. La prueba t se realizó para muestras independientes de los dos grupos según los resultados de verificación de ELISA, y un valor de P < 0,05 se consideró estadísticamente significativo. Se realizó la prueba de Hosmer-Lemeshow para evaluar el grado de calibración del modelo de predicción. La curva ROC se realizó mediante GraphPad Software (San Diego, CA), y se calcularon el área bajo la curva (AUC), la sensibilidad, la especificidad, el valor predictivo positivo y el valor predictivo negativo para evaluar el valor diagnóstico de la EP.

Todos los sujetos dieron su consentimiento informado para su inclusión antes de participar en el estudio. El estudio se realizó de acuerdo con la Declaración de Helsinki, y el protocolo fue aprobado por el Comité de Ética del Segundo Hospital de China Occidental de la Universidad de Sichuan (no. 124).

Todos los conjuntos de datos generados para este estudio están disponibles en el artículo.

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Estos autores contribuyeron por igual: Dan Ma y Ruiqing Yang.

Departamento de Medicina de Rehabilitación, Segundo Hospital Universitario de China Occidental, Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

dan ma

Escuela de Medicina de China Occidental de la Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Dan Ma, Ruiqing Yang, Yunlong Chen, Zhengyi Huang y Yuxin Shen

Laboratorio Clave de Defectos Congénitos y Enfermedades Relacionadas de Mujeres y Niños (Universidad de Sichuan), Ministerio de Educación, Chengdu, Sichuan, China

dan ma

Centro de Medicina del Departamento de Rehabilitación, Hospital de China Occidental, Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Chengqi él

Laboratorio clave de medicina de rehabilitación en la provincia de Sichuan, Chengdu, China

Chengqi él

Laboratorio Estatal Clave de Enfermedades Orales, Centro Nacional de Investigación Clínica para Enfermedades Orales, Chengdu, Sichuan, China

Lixing Zhao

Departamento de Ortodoncia, Hospital de Estomatología de China Occidental, Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Lixing Zhao

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DM y RY redactó el manuscrito. RY YC realizó los procedimientos de laboratorio. ZH realizó el análisis estadístico. YS recopiló y analizó datos. CH y LZ diseñaron el experimento revisado y revisaron críticamente el manuscrito. Todos los autores revisaron el manuscrito.

Correspondencia a Chengqi He o Lixing Zhao.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Reimpresiones y permisos

Ma, D., Yang, R., Chen, Y. et al. Identificación de biomarcadores de diagnóstico no invasivos para el embarazo ectópico utilizando proteómica de adquisición independiente de datos (DIA): un estudio piloto. Informe científico 12, 19992 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-23374-8

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Recibido: 23 Abril 2022

Aceptado: 31 de octubre de 2022

Publicado: 21 noviembre 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-23374-8

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